荧光原位杂交技术的特点
1、Southern 杂交Northern 杂交原位杂交，ISH荧光原位杂交，FISH芯片杂交，属于固一液相杂交每一种杂交技术都有其特点，因探针的选择不同又可以衍生出许多相关的技术，在不同领域发挥着重要作用。
2、辐射性杂交技术是继荧光原位杂交后新近建立的染色体定位方法，RH作图法提供了一种联系物理图和遗传图的方法，已成为当今构建人类基因组大尺度、高密度、连续的染色体图的常用方法之一。
3、荧光原位杂交技术的原理 荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。
4、原位杂交：在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。
5、FISH可以直观看到有含融合基因细胞的比例，还可以看到该细胞的形态学特征，这对于疾病诊断很重要。而RT-PCR灵敏度更高，对于MRD，微小残留病灶、CTC的监测很有帮助。
6、荧光原位杂交的原理：FISH，fluorescence in situ hybridization技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。
原位PCR的原位PCR的优势和不足
效果不好的原因是多方面的，如：玻片上做PCR，热传导较差，热对流不均匀，TaqDNA酶被玻璃片吸附等，更为主要的原因，可能是标本经制片后，细胞缺乏完整的胞浆或核膜，扩增产物易发生弥漫而导致扩增的产物在原位不易保留。
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术，就是在组织细胞里进行PCR反应，它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点，是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。
所以原位PCR中采用的Mg2+浓度要比PCR的要高，采用5-5mM可以保证有足够的Mg2+进行反应。另外由于原位PCR中的基因扩增过程中，各反应成分须经过渗透到靶DNA处才能进行扩增，所以建议将反应循环数增加到35 个。
对细胞中的靶DNA进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。可分为直接法 和间接法。
原PCR方法弥补了PCR技术和原位杂交技术的不足，是将目的基因的扩增与定位相结合的一种最佳方法。
PCR的优点是快速，灵敏，准确，只需极少样品即可进行扩增，适用于微量DNA片段的分析而不必耗费大量的精力去提取DNA，并且还具有根据设计合成任意长度的DNA片段的优势。
请教原位杂交
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交。
PKC 的检测PKC 的检测方法目前主要通过western Blot 分析，免疫组化，原位杂交、酶活性进行测定。311 western Blot 分析。
杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA，也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交，即细胞原位杂交。探针必须经过标记，以便示踪和检测。
可以找一些该遗传病的家族，克隆这个基因去测序，看看是否存在普遍的变异情况，然后再到小鼠上面去验证。确定是否存在小鼠中，PCR、southern、原位杂交技术等都ok，再建立小鼠疾病模型等。
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